Vizsgálatok

Vizsgálat keresése

 A minta

-    A klinikai kémiai méréseket általában szérumból végezzük el. A szérumot a teljes vér spontán koagulálása révén kapjuk. Plazmát teljes vérből kapunk, ha alvadásgátlót (EDTA, Na-citrát, Ca-oxalát, heparin, Na-fluorid) használunk. A szérum és a plazma közötti különbség általában a kálium, LDH, savanyú foszfatáz meghatározásánál vehető észre, vagy bármely meghatározásnál, ahol a használt alvadásgátló zavarja a metodikát.
-    Klinikai kémiai vizsgálatokhoz általában azért használunk szérumot, mert a plazma zavaros lehet, s az egyes alvadásgátlók zavarhatják a mérés menetét. Nincs olyan antikoaguláns, ami az összes analitikai módszerhez alkalmas lenne.
-    Trombocitózisos betegeknél, ha a trombocita számuk meghaladja a 800 G/l-t, káliumot csak heparinos plazmából lehet meghatározni.
Vérvétellel kapcsolatos rendszabályok
-    A vénát punkció előtt a lehető legrövidebb ideig pangassuk – az erős pangás miatt a vörösvértestek lízise, valamint a nem ultrafiltrálódó vérösszetevők koncentrációnövekedése következik be. Az izmok anaerob glikolízise miatt megnő a szérum laktát és piruvát tartalma.
-    El kell kerülni a vörösvértestek mechanikai károsodását – a vér erőteljes aspirációja, a vér szakszerűtlen kinyomása a vérvételi csőbe, vagy a minták erős rázása hemolízist okoz. A sejten belüli összetevők kijutása miatt tévesen emelkedett kálium, enzimek, vas, stb. értékeket kapunk a szérumban.
-    A mintákat az antikoagulánssal gondosan össze kell keverni – ellenkező esetben részleges alvadékképződés következik be, ami hamis eredményekhez vezet és a mérőműszerek eldugulását is eredményezheti.
-    Funkcionális vizsgálatok során a mintavételi időpontokat szigorúan be kell tartani – glükóztolerancia teszthez, clearence vizsgálathoz, gyógyszerszint – és hormon meghatározásokhoz, stb. a mintát az előírás szerinti időben kell levenni.
Szérum nyerése
-    A szérum csak akkor használható klinikai kémiai vizsgálatok céljaira, ha makroszkóposan nem látható hemolízis jele. Ha nincs mód ismételt vérvételre, elvégezhetjük azokat a vizsgálatokat, melyeket a hemolízis közvetlenül nem zavar, de az eredmények közlésekor a hemolízis tényét feltétlenül jelezni kell.
-    A frissen vett vért legalább 30 percig kell állni hagyni, naptól és közvetlen hőhatástól védve, hogy a spontán alvadás bekövetkezhessen. A mintát legalább 15 percig 3000 g-vel centrifugáljuk, ez kb. 4000/perc fordulatszámot jelent.
-    Ha a vérvételre használt csőben nincs elválasztó gél, a felülúszó savót tiszta, megírt csőbe töltjük át.
-    Ha az antikoagulánssal kezelt beteg vére csak lassan, vagy nem teljesen alvad meg, a szabályos centrifugálást követően is keletkezhet fibrin a mintában. Ilyen esetben a vizsgálati anyagot hosszabb állás után újból le kell centrifugálni.
Plazma nyerése
-    Ha a klinikai kémiai vizsgálatokhoz plazma szükséges, az alvadásgátlót szilárd alakban javasolt adni a vérhez, így nem áll elő térfogathiba.
-    Nincs olyan alvadásgátló, ami az összes klinikai kémiai módszerhez alkalmas lenne.
-    Az alvadásgátló nem tartalmazhatja a mérendő analitot, nem befolyásolhatja a vizsgálati módszert, és nem lehet enzimgátló.
-    A plazma még hosszabb centrifugálást követően is zavaros marad, ami a fotometriás méréseket zavarhatja.

Speciális tudnivalók

Vérkép meghatározása

-    Általában vénából nyert, K3-EDTA-val alvadásgátolt teljes vért használunk. Némely esetben EDTA indukálta pszeudotrombocitopénia alakulhat ki. Ennek gyanúja esetén a mérést Na-citráttal alvadásgátolt teljes vérből meg kell ismételni – pszeudotrombocitopénia esetén a sejtszám normális lesz.
Véralvadási vizsgálatok
-    A mintavételt lehetőleg éhgyomorra, pihenő betegnél kell elvégezni. A vér alvadását antikoaguláns oldattal akadályozzuk meg. A módszerekhez 9 rész vénás vér és egy rész 3,8% nátriumcitrát oldat keverékét használjuk.
-    A beérkezett mintákat 15 percig, kb. 2000 g-vel kell centrifugálni, s a vizsgálatokhoz a felülúszó plazmát használjuk.
-    Vérvételi hibák:
-    Pangás, több mint 2 percig → lízisfokozódás.
-    Sérülést okozó vénapunkció → szöveti tromboplasztin kerül a vérmintába.
-    Túl kicsi vérvételi tű átmérő → hemolízis.
-    Buborékos vérvétel → felületi aktiválódás.
-    Elégtelen keveredés az antikoagulánssal → lokális alvadás.
-    Nátrium-citrát-oldat nem pontosan 3,57 %-os → pH eltolódás a stabilizátor miatt.
-    Kontaminációk (bakteriális, a vérvételi tű vagy oldat heparinnal vagy trombinnal szennyeződik) → szisztematikus hibák.
-    A keverési arány nem 1:10, a hematokrit több, mint 60 %.
-    Étkezés utáni vérvétel → hiperlipémia
-    Heparin hozzákeverés vénás katéterből vagy fecskendőből.
-    A levett vérminta 2 óránál hosszabb tárolása melegben → V-ös és VIII-as faktor aktivitás csökkenés
-    Nehézkes kapilláris vérvétel (gyermekgyógyászatban)
-    Quick-idő meghatározásához az első cseppek nem használhatók a szöveti tromboplasztin hozzákeveredése miatt.

A minták szállítása és tárolása

-    A minták centrifugálása általában a mintavételt követő egy órán belül meg kell, hogy történjen. Ha a mintákat több óráig szobahőmérsékleten vagy hűtőszekrényben tároljuk, egyes anyagok a vörösvértestekből kidiffundálnak a szérumba (K, LDH, savi foszfatáz), mások a szérumból jutnak a vörösvértestekbe (klorid kicserélődik hidrogénkarbonátra). Emiatt a szérum vagy plazmamintákból végzett vizsgálatok, ha hosszabb ideig érintkeztek a sejtes elemekkel, hamis eredményt adnak. Ez a folyamat, ha kisebb mértékben is, a vérlepény és a felülúszó határfelületén is folytatódik.
-    A mintákat fénytől védeni kell, mert napfény hatására a bilirubin (erős nappali fénynél is) eloxidálódik és hamisan alacsony értéket adhat.
-    Ha a vizsgálati anyagból víz párolog el, megváltoznak a koncentrációértékek
-    A mintában lévő elektrolitok, szubsztrátok és enzimek általában hűtőszekrényben tárolva egy hétig stabilak (kivétel: savi foszfatáz, ammónia, kreatin kináz, laktát dehidrogenáz, laktát).
-    Hosszabb tároláshoz a mintákat –20 °C-ra le kell fagyasztani (kivéve, ha LDL, LDH vizsgálatot akarunk végezni). A lefagyasztott mintákat feloldás után gondosan össze kell keverni, amíg homogén mintát nem nyerünk, és a meghatározást minél előbb célszerű elvégezni. Ismételt fagyasztás nem ajánlatos.
-    Glükóz meghatározásánál a plazmát vagy szérumot a mintavétel után fél órán belül el kell választani. A szérum vagy plazma, amibe glikolízist gátló szert (Na-fluorid) tettünk, 12 órán át használható.
-    A szérum pH 8 körüli vegyhatása mellett még hűtőszekrényben is gyorsan inaktiválódnak a savi foszfatázok. Ezt elkerülendő, a szérumhoz milliliterenként 10 μl 20%-os ecetsavat adva a pH érték 5,5-re csökken.
-    Hematológia: a sejtösszetevők és a hemoglobin egy napig stabilak, de a minőségi vérképet 4 órán belül el kell készíteni, mert hosszabb tárolás után morfológiai változások következnek be.
-    Véralvadás: a meghatározásokat minél előbb el kell végezni. A rutin meghatározásokhoz a plazma szobahőn 4 órán át tárolható.
-    Vérgáz: az analízist lehetőleg azonnal el kell végezni. Ha erre nincs mód, a minták legfeljebb 2 óráig tárolhatók jeges vízben. Ilyenkor a glikolízis gyakorlatilag teljesen leáll, nem képződik tejsav, a pH értéke nem tolódik el.
-    Ha bizonyos vizsgálatokhoz elszállíttatjuk a mintát, akkor azokat lefagyasztva, jégakkuval szállítjuk.
Étkezés, gyógyszerszedés, napszak befolyásoló hatása
-    Evés után a glukóz, koleszterin, triglicerid, anorganikus foszfor, vas és az aminosavak mennyisége a vérben ugrásszerűen megnő.
-    Az alkohol növeli a γ-glutamil-transzferáz és az MCV értékeket.
-    Jelentős eltérések vannak a napközi értékekben a következőknél: hormonok, vizeletben ürített elektrolitok, szérum hemoglobin, vas.
-    Számos gyógyszer befolyásolja a mérési eredményeket.
-    Ha a pácienst vízszintes pozícióból függőleges pozícióba helyezzük, a következő tesztek eredménye kb. 10%-kal lesz magasabb: összfehérje, enzimek, lipoproteinek, proteinhez kötött ionok (kalcium, vas), fehérvérsejtek, vörösvértestek, hematokrit, hemoglobin.
-    Amennyiben lehetséges, a mintavétel mindig standardizált körülmények között történjen: éhgyomorra, mindig ugyanabban a pozícióban (ülő vagy fekvő), a napnak ugyanabban az időszakában.